Санитарная микробиология,род Сальмонелла

+ положительная

(+) замедленно положительная  (от 9 до 18сут.)

 

Таблица 4. количество положительных реакций для штаммов бактерий рода Salmonella в процентах [13].

Тесты	Штаммы сальмонелл
	S.Typhi	S.Para-typhi A	Другие штаммы
			S.Arizonae	S.Cholerae-suis	S.Gallina-rum	S.Pullo-rum
Кислота из глюкозы	100	100	100	100	100	100
Газ из глюкозы	10 и менее	90 и более	90 и более	90 и более	100 и менее	90 и более
Кислота из лактозы	10 и менее	10 и менее	10-25	10 и менее	10 и менее	10 и менее
Кислота из сахарозы	0	0	1	0	0	0
H2S-продукция	8	1	99	64	25	85
Гидролиз мочевины	0	0	0	0	0	0
Лизиндекар-боксилоза	99	0	97	99	100	75
β-галакто-зидаза	0	0	98	0	0	0
Продукция ацетоина	0	0	0	0	0	0
Продукция индола	0	0	1	0	0	0
Подвижность	97	95	99	95	0	0
Кислота из маннита	90 и более	90 и более	90 и более	90 и более	90 и более	90 и более

 

В межобластной лаборатории  для ускорения и облегчения процесса идентификации используют тест-систему API 20E. Состоит из прозрачной полимерной пластинки с 20 микропробирками, содержащими дегидратированные субстраты для определения 20 тестов: β-галактозидазы, лизиндекарбоксилазы, орнитидекарбоксилазы, уреазы; образования индола, ацетоина; ферментации цитрата, эскулина, маннитола, арабинозы, ксилозы, адонитола, рамнозы, целлобиозы, мелецитозы, сахарозы, трегалозы, рафинозы, глюкозы. Исследования проводят по инструкции добавляя культуру, масла. Результаты учитывают через 24 ч инкубации при 37°С. Вид бактерий идентифицируют по приложению к инструкции.

Результаты тестов вносят в программу «Веста».

Также в лаборатории используют Vidas для скорого определения наличия сальмонелл в пробах. Для этого прибора используют 1 мл забуферной пептонной воды после предварительного селективного обогащения.

 

2.6. Серологическая типизация  сальмонелл

Для серотипирования сальмонелл используют реакцию агглютинации с  сальмонеллезными сыворотками. Бактерии этого рода, в большинстве случаев, имеют два антигена: термостабильный 0-антиген(соматический, связанный с телом) и термолабильный Н-антиген (жгутиковый, связанный с двигательным аппаратом). Последнего нет у неподвижных сальмонелл (S.Gallinarum).

Реакцию агглютинации ставят на предметном стекле с агглютинирующими адсорбированными поливалентными сальмонеллезными 0-сыворотками  основных групп А, В, С, D, Е, а затем, если не выявлено 0-антигенов с сыворотками основных групп, ставят реакцию с сыворотками редких групп. Подготовка сывороток заключается в их разведении в 1,0 или 2,0 мл физиологического раствора. Методика постановки заключается в добавлении к сыворотке культуры бактериальной петлей и тщательном размешивании. Агглютинация проявляется в виде склеивания бактериальной массы и просветления жидкости [13]. Реакция с первой сывороткой говорит о том, что изучаемый микроорганизм – сальмонелла.

На втором этапе определяют серологическую группу. Для этого  реакцию ставят остальными семью  сыворотками первого набора по очереди. После этого по специальной таблице, приведенной в «Наставлении по применению наборов сывороток», определяют, какой  из рецепторов стоит на первом месте, он и считается ведущим антигеном. Затем, по второй таблице, определяют серологическую группу [12].

На третьем этапе определяют серовариант сальмонеллы с Н-сыворотками сначала первой, затем второй фазы до первого «+». По таблице определяют тип.

Во всех положительно исследованных  мною пробах обнаружена Salmonella Cerro (группа К (О:18), 0-антиген _6_,_14_,18; 1 фаза Н-антигена z_4, z_23, 2 фаза [1,5]).

 

 

ӀӀӀ. Выводы

 

Сальмонелла относится к  патогенным микроорганизмам, наличие  которых строго регламентируется нормативными документами. Обсеменение этими  бактериями, как правило, является вторичным. Этот род представляет собой один из 12 родов Enterobacteriaceae и включает в себя около 2500 серотипов и достаточно широко распространен в природе.

Знания о таком микроорганизме как сальмонелла необходимы нам  как ветеринарно-санитарным специалистам. При контаминации ими пищевых  продуктов создается возможность  возникновения токсикоинфекции  при употреблении их отдельными лицами или целыми группами людей. Чтобы  предотвратить такие последствия  необходимо вовремя диагностировать  контаминацию и/или заражение.

Данная курсовая работа помогла  мне систематизировать полученные во время практики знания, теоретически изложить практически отработанные приемы и методики.

 

 

ӀV. Список литературы

 

1. Бакулов И.А., Ведерников В.А., Семенихин А.Л. Эпизоотология с микробиологией/ под ред. И.А.Бакулова. – М.:Колос, 2000. – 481с.
2. Боровков М.Ф., Фролов В.П., Серко С.А. Ветеринарно-санитарная экспертиза с основами технологии и стандартизации продуктов животноводства: Учебник / под ред. проф. М.Ф.Боровкова. – СПб.: «Лань», 2007. – 448с.
3. Гусев М.В. Микробиология: Учебник. – М., 2003. – 464с.
4. Калина Г.П. сальмонеллы в окружающей среде. – М.: «Медицина», 1978. – 160с.
5. Карцев В.В., Белова Л.В., Иванов В.П. санитарная микробиология пищевых продуктов. – СПб: СПбГМА им. И.И.Мечникова, 2000. – 312с.
6. Лузина Н.И. микробиология мяса и мясных продуктов: Учебное пособие. – Кемерово: Кемеровский технологический институт пищевой промышленности, 2004. – 75с.
7. Попова П.П. Экология сальмонелл и эпидемиология сальмонеллезов/ П.П.Попова, М.М.Ременцова, А.А.Ким – Алма-Ата: Наука Казахстана, 1987. – 128с.
8. Практикум по ветеринарно-санитарной экспертизе с основами технологии продуктов животноводства/ Макаров В.А., Боровков М.Ф., Ермолаев А.П. и др.; под ред. Макарова В.А. – М.: «Агропромиздат», 1987. – 271с.
9. Сбойчаков В.Б. Санитарная микробиология.- М.:ГЭОТАР-Медиа, 2007.- 192с.
10. Смирнов А.В. Лекция «Ветеринарно-санитарная экспертиза при пищевых болезнях» от 21.02.12
11. Смирнова Л.И., Забровская А.В., Сухинин А.А. особенности идентификации сальмонелл и их дифференциация от сходных по биологическим свойствам микроорганизмов/ Методическое пособие для врачей ФПК. – СПб.: СПбГАВМ, 2008. – 20с.
12. Смирнова Л.И., Приходько Е.И., Сухинин А.А и др. методы определения показателей микробиологической безопасности пищевых продуктов. Учебно-методическое пособие к лабораторно-практическим занятиям по санитарной микробиологии. Часть 3. – СПб.: СПбГАВМ, 2012. – 94с.

Нормативные документы:

13. ГОСТ Р 52814-2007 (ИСО 6579:2002) Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода Salmonella
14. СанПиН 2.3.2.1078-01 Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов
15. Санитарно-эпидемиологические правила 3.1.7.2616-10 «Профилактика сальмонеллеза», утв. Постановлением главного государственного санитарного врача РФ от 26.04.2010 №36

 

Интернет-ресурсы:

16. http://www.consultant.ru/online/ - официальный сайт «Консультант Плюс»
17. http://www.himedialabs.ru/ - сайт научного центра «HIMEDIA»